સાપના ઝેરમાં કાર્બોક્સિલ એસ્ટર બોન્ડ પર કામ કરતા ઉત્સેચકો

સાપના ઝેરમાં ઉત્સેચકો હોય છે જે કાર્બોક્સિલ એસ્ટર બોન્ડને હાઇડ્રોલાઈઝ કરે છે.હાઇડ્રોલિસિસ માટેના સબસ્ટ્રેટ્સ ફોસ્ફોલિપિડ્સ, એસિટિલકોલાઇન અને સુગંધિત એસિટેટ છે.આ ઉત્સેચકોમાં ત્રણ પ્રકારના સમાવેશ થાય છે: ફોસ્ફોલિપેઝ, એસિટિલકોલિનેસ્ટેરેઝ અને એરોમેટિક એસ્ટેરેઝ.સાપના ઝેરમાં આર્જિનિન એસ્ટેરેઝ કૃત્રિમ આર્જિનિન અથવા લાયસિનનું પણ હાઇડ્રોલાઇઝ કરી શકે છે, પરંતુ તે મુખ્યત્વે પ્રકૃતિમાં પ્રોટીન પેપ્ટાઇડ બોન્ડને હાઇડ્રોલાઇઝ કરે છે, તેથી તે પ્રોટીઝનું છે.અહીં ચર્ચા કરાયેલ ઉત્સેચકો માત્ર એસ્ટર સબસ્ટ્રેટ પર કાર્ય કરે છે અને કોઈપણ પેપ્ટાઈડ બોન્ડ પર કાર્ય કરી શકતા નથી.આ ઉત્સેચકોમાં, એસિટિલકોલિનેસ્ટેરેઝ અને ફોસ્ફોલિપેઝના જૈવિક કાર્યો વધુ મહત્વપૂર્ણ છે અને તેનો સંપૂર્ણ અભ્યાસ કરવામાં આવ્યો છે.કેટલાક સાપના ઝેરમાં મજબૂત સુગંધિત એસ્ટેરેઝ પ્રવૃત્તિ હોય છે, જે પી-નાઇટ્રોફેનાઇલ ઇથિલ એસ્ટર, એ – અથવા પી-નેપ્થાલિન એસીટેટ અને ઇન્ડોલ ઇથિલ એસ્ટરને હાઇડ્રોલાઈઝ કરી શકે છે.તે હજુ પણ અજ્ઞાત છે કે શું આ પ્રવૃત્તિ સ્વતંત્ર એન્ઝાઇમ અથવા કાર્બોક્સિલેસ્ટેરેઝની જાણીતી આડઅસર દ્વારા ઉત્પન્ન થાય છે, તેના જૈવિક મહત્વને છોડી દો.જ્યારે એગ્કિસ્ટ્રોડોન હેલીસ જેપોનિકસના ઝેરને પી-નાઇટ્રોફેનાઇલ ઇથિલ એસ્ટર અને ઇન્ડોલ ઇથિલ એસ્ટર સાથે પ્રતિક્રિયા આપવામાં આવી હતી, ત્યારે પી-નાઇટ્રોફેનોલ અને ઇન્ડોલ ફિનોલના હાઇડ્રોલિસેટ્સ મળ્યા ન હતા;તેનાથી વિપરિત, જો આ એસ્ટર્સ કોબ્રા ઝુશાન પેટાજાતિના સાપના ઝેર અને બંગરસ મલ્ટિસિંકટસ સાપના ઝેર સાથે પ્રતિક્રિયા આપે છે, તો તેઓ ઝડપથી હાઇડ્રોલાઇઝ્ડ થઈ જશે.તે જાણીતું છે કે આ કોબ્રા ઝેરમાં મજબૂત કોલિનેસ્ટેરેઝ પ્રવૃત્તિ હોય છે, જે ઉપરોક્ત સબસ્ટ્રેટના હાઇડ્રોલિસિસ માટે જવાબદાર હોઈ શકે છે.હકીકતમાં, Mclean et al.(1971) અહેવાલ આપ્યો છે કે કોબ્રા પરિવારના ઘણા સાપના ઝેર ઇન્ડોલ ઇથિલ એસ્ટર, નેપ્થાલિન ઇથિલ એસ્ટર અને બ્યુટાઇલ નેપ્થાલિન એસ્ટરને હાઇડ્રોલાઈઝ કરી શકે છે.આ સાપના ઝેરો આમાંથી આવે છે: કોબ્રા, બ્લેક નેક કોબ્રા, બ્લેક લિપ્ડ કોબ્રા, ગોલ્ડન કોબ્રા, ઇજિપ્તીયન કોબ્રા, કિંગ કોબ્રા, ગોલ્ડન કોબ્રા મામ્બા, બ્લેક મામ્બા અને વ્હાઇટ લિપ્ડ મામ્બા (D. aw હજુ પણ પૂર્વીય રોમ્બોલા રેટલસ્નેકને જાણે છે.

સાપનું ઝેર મિથાઈલ ઈન્ડોલ એથિલ એસ્ટરને હાઈડ્રોલાઈઝ કરી શકે છે, જે સીરમમાં કોલિનેસ્ટેરેઝ પ્રવૃત્તિ નક્કી કરવા માટે સબસ્ટ્રેટ છે, પરંતુ આ સાપનું ઝેર કોલિનેસ્ટેરેઝ પ્રવૃત્તિ દર્શાવતું નથી.આ બતાવે છે કે કોબ્રા ઝેરમાં અજાણ્યું એસ્ટેરેઝ છે, જે કોલિનેસ્ટેરેઝથી અલગ છે.આ એન્ઝાઇમની પ્રકૃતિને સમજવા માટે, વધુ વિભાજન કાર્યની જરૂર છે.

1, ફોસ્ફોલિપેઝ A2

(I) ઝાંખી

ફોસ્ફોલિપેઝ એ એન્ઝાઇમ છે જે ગ્લિસરિલ ફોસ્ફેટને હાઇડ્રોલાઈઝ કરી શકે છે.પ્રકૃતિમાં 5 પ્રકારના ફોસ્ફોલિપેઝ છે, જેમ કે ફોસ્ફોલિપેઝ A2 અને ફોસ્ફોલિપેઝ

A. , phospholipase B, phospholipase C અને phospholipase D. સાપના ઝેરમાં મુખ્યત્વે ફોસ્ફોલિપેઝ A2 (PLA2) હોય છે, કેટલાક સાપના ઝેરમાં ફોસ્ફોલિપેઝ B હોય છે, અને અન્ય ફોસ્ફોલિપેસ મુખ્યત્વે પ્રાણીની પેશીઓ અને બેક્ટેરિયામાં જોવા મળે છે.ફિગ. 3-11-4 સબસ્ટ્રેટ હાઇડ્રોલિસિસ પર આ ફોસ્ફોલિપેસેસની ક્રિયા સ્થળ બતાવે છે.

ફોસ્ફોલિપેસિસમાં, PLA2 નો વધુ અભ્યાસ કરવામાં આવ્યો છે.તે સાપના ઝેરમાં સૌથી વધુ અભ્યાસ કરાયેલ એન્ઝાઇમ હોઈ શકે છે.તેનું સબસ્ટ્રેટ Sn-3-ગ્લાયસેરોફોસ્ફેટના બીજા સ્થાન પર એસ્ટર બોન્ડ છે.આ એન્ઝાઇમ સાપના ઝેર, મધમાખીના ઝેર, વીંછીના ઝેર અને પ્રાણીઓની પેશીઓમાં વ્યાપકપણે જોવા મળે છે અને PLA2 ચાર કુટુંબના સાપના ઝેરમાં વિપુલ પ્રમાણમાં જોવા મળે છે.કારણ કે આ એન્ઝાઇમ લાલ રક્ત કોશિકાઓને તોડે છે અને હેમોલિસિસનું કારણ બને છે, તેને "હેમોલિસિન" પણ કહેવામાં આવે છે.કેટલાક લોકો PLA2 હેમોલિટીક લેસીથિનેઝ પણ કહે છે.

લુડીકેને સૌપ્રથમ જાણવા મળ્યું કે સાપનું ઝેર ઉત્સેચકો દ્વારા લેસીથિન પર કાર્ય કરીને હેમોલિટીક સંયોજન પેદા કરી શકે છે.પાછળથી, ડેલેઝેન એટ અલ.સાબિત થયું કે જ્યારે કોબ્રા ઝેર ઘોડાના સીરમ અથવા જરદી પર કાર્ય કરે છે, ત્યારે તે હેમોલિટીક પદાર્થ બનાવે છે.તે હવે જાણીતું છે કે PLA2 એ એરિથ્રોસાઇટ પટલના ફોસ્ફોલિપિડ્સ પર સીધું કાર્ય કરી શકે છે, એરિથ્રોસાઇટ પટલની રચનાને નષ્ટ કરી શકે છે અને ડાયરેક્ટ હેમોલિસિસનું કારણ બને છે;તે હેમોલિટીક લેસીથિન ઉત્પન્ન કરવા માટે સીરમ અથવા ઉમેરેલા લેસીથિન પર પણ કાર્ય કરી શકે છે, જે પરોક્ષ હેમોલિસિસ ઉત્પન્ન કરવા માટે લાલ રક્ત કોશિકાઓ પર કાર્ય કરે છે.સાપના ઝેરના ચાર પરિવારોમાં PLA2 વિપુલ પ્રમાણમાં હોવા છતાં, વિવિધ સાપના ઝેરમાં ઉત્સેચકોની સામગ્રી થોડી અલગ હોય છે.રેટલસ્નેક (સી

સાપનું ઝેર માત્ર નબળી PLA2 પ્રવૃત્તિ દર્શાવે છે.કોષ્ટક 3-11-11 ચીનમાં ઝેરી સાપના 10 મુખ્ય ઝેરની PLA2 પ્રવૃત્તિની સરખામણી દર્શાવે છે.

કોષ્ટક 3-11-11 ચીનમાં 10 સાપના ઝેરની ફોસ્ફોલિપેઝ VIII પ્રવૃત્તિઓની સરખામણી

સાપનું ઝેર

ચરબી મુક્તિ

એલિફેટિક એસિડ,

Cjumol/mg)

હેમોલિટીક પ્રવૃત્તિ CHU50/^ g * ml)

સાપનું ઝેર

ફેટી એસિડ્સ છોડો

(^raol/mg)

હેમોલિટીક પ્રવૃત્તિ "(HU50/ftg * 1111)

નજનજા અત્રા

9. 62

અગિયાર

માઇક્રોસેફલ ઓફિસ

પાંચ પોઈન્ટ એક શૂન્ય

kalyspallas

8. 68

બે હજાર અને આઠસો

ગ્રેસિલિસ

વી, એક્યુટસ

7. 56

* * #

ઓફિઓફેગસ હેન્ના

ત્રણ પોઈન્ટ આઠ બે

એકસો ચાલીસ

Bnugarus fasctatus

7,56 પર રાખવામાં આવી છે

બેસો અને એંસી

B. મલ્ટિસિંકટસ

એક પોઈન્ટ નવ સિક્સ

બેસો અને એંસી

વાઇપર એ રસેલી

સાત પોઈન્ટ શૂન્ય ત્રણ

ટી, મ્યુક્રોસ્કવામેટસ

એક પોઈન્ટ આઠ પાંચ

સિયામેન્સિસ

ટી. સ્ટેજનેગેરી

0. 97

(2) વિભાજન અને શુદ્ધિકરણ

સાપના ઝેરમાં PLA2 ની સામગ્રી મોટી હોય છે, અને તે ગરમી, એસિડ, આલ્કલી અને ડિનેચ્યુરન્ટ માટે સ્થિર હોય છે, જેથી PLA2 ને શુદ્ધ કરવામાં અને અલગ કરવામાં સરળતા રહે છે.સામાન્ય પદ્ધતિ એ છે કે પ્રથમ ક્રૂડ ઝેર પર જેલ ફિલ્ટરેશન હાથ ધરવું, પછી આયન વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફી હાથ ધરવી, અને આગળનું પગલું પુનરાવર્તિત કરી શકાય છે.એ નોંધવું જોઈએ કે આયન-વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફી પછી PLA2 નું ફ્રીઝ-ડ્રાયિંગ એકત્રીકરણનું કારણ ન હોવું જોઈએ, કારણ કે ફ્રીઝ-ડ્રાયિંગ પ્રક્રિયા ઘણીવાર સિસ્ટમમાં આયનીય શક્તિમાં વધારો કરે છે, જે PLA2 ના એકત્રીકરણનું કારણ બને છે તે મહત્વનું પરિબળ છે.ઉપરોક્ત સામાન્ય પદ્ધતિઓ ઉપરાંત, નીચેની પદ્ધતિઓ પણ અપનાવવામાં આવી છે: ① વેલ્સ એટ અલ.② PLA2 ના સબસ્ટ્રેટ એનાલોગનો ઉપયોગ એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફી માટે લિગાન્ડ તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો.આ લિગાન્ડ Ca2+ સાથે સાપના ઝેરમાં PLA2 સાથે જોડાઈ શકે છે.EDTA નો ઉપયોગ મોટે ભાગે eluent તરીકે થાય છે.Ca2+ દૂર થયા પછી, PLA2 અને લિગાન્ડ વચ્ચેનો સંબંધ ઘટે છે અને તેને લિગાન્ડથી અલગ કરી શકાય છે.અન્ય લોકો 30% ઓર્ગેનિક સોલ્યુશન અથવા 6mol/L યુરિયાનો ઉપયોગ એલ્યુએન્ટ તરીકે કરે છે.③ કાર્ડિયોટોક્સિનમાં PLA2 ટ્રેસ દૂર કરવા PheiiylSephar0SeCL-4B સાથે હાઇડ્રોફોબિક ક્રોમેટોગ્રાફી કરવામાં આવી હતી.④ એન્ટી PLA2 એન્ટિબોડીનો ઉપયોગ PLA2 પર એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફી કરવા માટે લિગાન્ડ તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો.

અત્યાર સુધીમાં મોટી સંખ્યામાં સાપનું ઝેર PLAZ શુદ્ધ કરવામાં આવ્યું છે.તુ એટ અલ.(1977) 1975 પહેલા સાપના ઝેરથી શુદ્ધ થયેલ PLA2 સૂચિબદ્ધ છે. તાજેતરના વર્ષોમાં, PLA2 ના વિભાજન અને શુદ્ધિકરણ વિશે મોટી સંખ્યામાં લેખો દર વર્ષે નોંધાયા છે.અહીં, અમે ચીની વિદ્વાનો દ્વારા PLA ના અલગ અને શુદ્ધિકરણ પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરીએ છીએ.

ચેન યુઆનકોંગ એટ અલ.(1981) એ ઝેજીઆંગમાં એગ્કિસ્ટ્રોડોન હેલીસ પલ્લાસના ઝેરમાંથી ત્રણ PLA2 પ્રજાતિઓને અલગ કરી હતી, જેને તેમના આઇસોઇલેક્ટ્રિક બિંદુઓ અનુસાર એસિડિક, તટસ્થ અને આલ્કલાઇન PLA2માં વિભાજિત કરી શકાય છે.તેની ઝેરીતા અનુસાર, તટસ્થ PLA2 વધુ ઝેરી છે, જેને પ્રેસિનેપ્ટિક ન્યુરોટોક્સિન એગ્કિસ્ટ્રોડોટોક્સિન તરીકે ઓળખવામાં આવે છે.આલ્કલાઇન PLA2 ઓછું ઝેરી છે, અને એસિડિક PLA2 લગભગ કોઈ ઝેરી નથી.વુ ઝિયાંગફુ એટ અલ.(1984) પરમાણુ વજન, એમિનો એસિડ કમ્પોઝિશન, એન-ટર્મિનલ, આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ, થર્મલ સ્થિરતા, એન્ઝાઇમ પ્રવૃત્તિ, ઝેરી અને હેમોલિટીક પ્રવૃત્તિ સહિત ત્રણ PLA2 ની લાક્ષણિકતાઓની તુલના કરી.પરિણામો દર્શાવે છે કે તેઓ સમાન પરમાણુ વજન અને થર્મલ સ્થિરતા ધરાવે છે, પરંતુ અન્ય પાસાઓમાં નોંધપાત્ર તફાવત ધરાવે છે.એન્ઝાઇમ પ્રવૃત્તિના પાસામાં, એસિડ એન્ઝાઇમ પ્રવૃત્તિ આલ્કલાઇન એન્ઝાઇમ પ્રવૃત્તિ કરતાં વધુ હતી;ઉંદરના લાલ રક્ત કોશિકાઓ પર આલ્કલાઇન એન્ઝાઇમની હેમોલિટીક અસર સૌથી મજબૂત હતી, ત્યારબાદ તટસ્થ એન્ઝાઇમ આવે છે, અને એસિડ એન્ઝાઇમ ભાગ્યે જ હેમોલાઇઝ્ડ થાય છે.તેથી, એવું અનુમાન કરવામાં આવે છે કે PLAZ ની હેમોલિટીક અસર PLA2 પરમાણુના ચાર્જ સાથે સંબંધિત છે.ઝાંગ જિંગકાંગ એટ અલ.(1981) એગ્કિસ્ટ્રોડોટોક્સિન સ્ફટિકો બનાવ્યા છે.તુ ગુઆંગલિઆંગ એટ અલ.(1983) અહેવાલ આપ્યો છે કે 7. 6 ના આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ સાથેનું ઝેરી પીએલએ ફુજિયનના વાઇપેરા રોટન્ડસના ઝેરથી અલગ અને શુદ્ધ કરવામાં આવ્યું હતું, અને તેના ભૌતિક અને રાસાયણિક ગુણધર્મો, એમિનો એસિડ રચના અને એન પર 22 એમિનો એસિડ અવશેષોનો ક્રમ. - ટર્મિનલ નક્કી કરવામાં આવ્યું હતું.લી યુશેંગ એટ અલ.(1985) ફુજિયનમાં વાઇપર રોટન્ડસના ઝેરમાંથી બીજા PLA2 ને અલગ અને શુદ્ધ કર્યું.PLA2 * નું સબયુનિટ 13 800 છે, આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ 10.4 છે, અને ચોક્કસ પ્રવૃત્તિ 35/xnioI/miri mg છે. સબસ્ટ્રેટ તરીકે લેસીથિન સાથે, એન્ઝાઇમનું શ્રેષ્ઠ pH 8.0 છે અને શ્રેષ્ઠ તાપમાન 65 ° સે છે. LD5 ઉંદરમાં નસમાં ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવે છે.તે 0.5 ± 0.12mg/kg છે.આ એન્ઝાઇમમાં સ્પષ્ટ એન્ટીકોએગ્યુલન્ટ અને હેમોલિટીક અસરો છે.ઝેરી PLA2 પરમાણુમાં 18 પ્રકારના એમિનો એસિડના 123 અવશેષો હોય છે.પરમાણુ સિસ્ટીન (14), એસ્પાર્ટિક એસિડ (14) અને ગ્લાયસીન (12) થી સમૃદ્ધ છે, પરંતુ તેમાં માત્ર એક મેથિઓનાઇન છે, અને તેનું એન-ટર્મિનલ સેરીન અવશેષ છે.તુગુઆંગ દ્વારા અલગ કરાયેલ PLA2 ની તુલનામાં, પરમાણુ વજન અને બે આઇસોએન્ઝાઇમના એમિનો એસિડ અવશેષોની સંખ્યા ખૂબ સમાન છે, અને એમિનો એસિડની રચના પણ ખૂબ સમાન છે, પરંતુ એસ્પાર્ટિક એસિડ અને પ્રોલાઇન અવશેષોની સંખ્યા કંઈક અંશે અલગ છે.ગુઆંગસી કિંગ કોબ્રા સાપના ઝેરમાં સમૃદ્ધ PLA2 હોય છે.શુ યુયાન એટ અલ.(1989) એ ઝેરમાંથી PLA2 ને અલગ કર્યું, જે મૂળ ઝેર કરતાં 3.6 ગણી વધારે ચોક્કસ પ્રવૃત્તિ ધરાવે છે, 13000 નું પરમાણુ વજન, 122 એમિનો એસિડ અવશેષોની રચના, 8.9 નું આઇસોઇલેક્ટ્રિક બિંદુ અને સારી થર્મલ સ્થિરતા ધરાવે છે.લાલ રક્ત કોશિકાઓ પર મૂળભૂત PLA2 ની અસરના ઇલેક્ટ્રોન માઇક્રોસ્કોપ અવલોકનમાંથી, તે જોઈ શકાય છે કે તે માનવ લાલ રક્ત કોશિકા કલા પર સ્પષ્ટ અસર કરે છે, પરંતુ બકરીના લાલ રક્ત કોશિકાઓ પર તેની કોઈ સ્પષ્ટ અસર નથી.આ PLA2 મનુષ્યો, બકરા, સસલા અને ગિનિ પિગમાં લાલ રક્ત કોશિકાઓની ઇલેક્ટ્રોફોરેટિક ગતિ પર સ્પષ્ટ મંદતા અસર ધરાવે છે.ચેન એટ અલ.આ એન્ઝાઇમ ADP, કોલેજન અને સોડિયમ એરાચિડોનિક એસિડ દ્વારા પ્રેરિત પ્લેટલેટ એકત્રીકરણને અટકાવી શકે છે.જ્યારે PLA2 સાંદ્રતા 10/xg/ml~lOOjug/ml હોય છે, ત્યારે પ્લેટલેટ એકત્રીકરણ સંપૂર્ણપણે અવરોધાય છે.જો ધોવાઇ પ્લેટલેટ્સનો ઉપયોગ સામગ્રી તરીકે કરવામાં આવે, તો PLA2 20Mg/ml ની સાંદ્રતા પર એકત્રીકરણને અટકાવી શકતું નથી.એસ્પિરિન એ સાયક્લોઓક્સિજેનેઝનું અવરોધક છે, જે પ્લેટલેટ્સ પર PLA2 ની અસરને અટકાવી શકે છે.PLA2 થ્રોમ્બોક્સેન A2 ને સંશ્લેષણ કરવા માટે એરાચિડોનિક એસિડનું હાઇડ્રોલાઇઝિંગ કરીને પ્લેટલેટ એકત્રીકરણને અટકાવી શકે છે.ઝેજિયાંગ પ્રાંતમાં એગ્કિસ્ટ્રોડોન હેલીસ પલ્લાસ ઝેર દ્વારા ઉત્પાદિત PLA2 ના ઉકેલની રચનાનો અભ્યાસ ગોળાકાર ડિક્રોઇઝમ, ફ્લોરોસેન્સ અને યુવી શોષણ દ્વારા કરવામાં આવ્યો હતો.પ્રાયોગિક પરિણામો દર્શાવે છે કે આ એન્ઝાઇમની મુખ્ય સાંકળ રચના અન્ય પ્રજાતિઓ અને જાતિઓમાંથી સમાન પ્રકારના એન્ઝાઇમની સમાન હતી, હાડપિંજર રચનામાં સારી ગરમી પ્રતિરોધક હતી, અને એસિડ વાતાવરણમાં માળખાકીય પરિવર્તન ઉલટાવી શકાય તેવું હતું.એક્ટિવેટર Ca2+ અને એન્ઝાઇમનું મિશ્રણ ટ્રિપ્ટોફન અવશેષોના પર્યાવરણને અસર કરતું નથી, જ્યારે અવરોધક Zn2+ તેનાથી વિરુદ્ધ કરે છે.જે રીતે ઉકેલનું pH મૂલ્ય એન્ઝાઇમની પ્રવૃત્તિને અસર કરે છે તે ઉપરોક્ત રીએજન્ટ્સથી અલગ છે.

સાપના ઝેરના PLA2 શુદ્ધિકરણની પ્રક્રિયામાં, એક સ્પષ્ટ ઘટના એ છે કે સાપના ઝેરમાં બે અથવા વધુ PLA2 ઉત્સર્જન શિખરો હોય છે.આ ઘટનાને નીચે પ્રમાણે સમજાવી શકાય છે: ① આઇસોઝાઇમ્સના અસ્તિત્વને કારણે;② એક પ્રકારનું PLA2 વિવિધ પરમાણુ વજન સાથે વિવિધ PLA2 મિશ્રણોમાં પોલિમરાઇઝ્ડ છે, જેમાંથી મોટાભાગના 9 000~ 40 000 ની રેન્જમાં છે;③ PLA2 અને અન્ય સાપના ઝેરના ઘટકોનું સંયોજન PLA2 ને જટિલ બનાવે છે;④ કારણ કે PLA2 માં એમાઈડ બોન્ડ હાઇડ્રોલાઇઝ્ડ છે, ચાર્જ બદલાય છે.① અને ② સામાન્ય છે, માત્ર થોડા અપવાદો સાથે, જેમ કે CrWa/w સાપના ઝેરમાં PLA2

ત્યાં બે પરિસ્થિતિઓ છે: ① અને ②.PLA2 માં નીચેના સાપના ઝેરમાં ત્રીજી સ્થિતિ જોવા મળી છે: ઓક્સીરેનસ સ્કુટેલેટસ, પેરાડેમેન્સિયા માઇક્રોલેપિડોટા, બોથ્રોપ્સ એ ^>ર, પેલેસ્ટિનિયન વાઇપર, સેન્ડ વાઇપર અને ભયંકર રેટલસ્નેક કિમી.

કેસનું પરિણામ ④ ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ દરમિયાન PLA2 ની સ્થળાંતર ગતિમાં ફેરફાર કરે છે, પરંતુ એમિનો એસિડની રચના બદલાતી નથી.પેપ્ટાઇડ્સને હાઇડ્રોલિસિસ દ્વારા તોડી શકાય છે, પરંતુ સામાન્ય રીતે તેઓ હજુ પણ ડાયસલ્ફાઇડ બોન્ડ દ્વારા એકસાથે બંધાયેલા છે.પૂર્વીય પીટ રેટલસ્નેકના ઝેરમાં PLA2 ના બે સ્વરૂપો હોય છે, જેને અનુક્રમે પ્રકાર a અને પ્રકાર p PLA2 કહેવાય છે.આ બે પ્રકારના PLA2 વચ્ચેનો તફાવત માત્ર એક એમિનો એસિડ છે, એટલે કે, એક PLA2 પરમાણુમાં ગ્લુટામાઇનને અન્ય PLA2 પરમાણુમાં ગ્લુટામિક એસિડ દ્વારા બદલવામાં આવે છે.જો કે આ તફાવતનું ચોક્કસ કારણ સ્પષ્ટ નથી, સામાન્ય રીતે એવું માનવામાં આવે છે કે તે PLA2 ના ડિમિનેશન સાથે સંબંધિત છે.જો પેલેસ્ટિનિયન વાઇપર ઝેરમાં PLA2 ને ક્રૂડ ઝેર સાથે ગરમ રાખવામાં આવે છે, તો તેના એન્ઝાઇમ પરમાણુઓમાં અંતિમ જૂથો પહેલા કરતાં વધુ બની જશે.સાપના ઝેરથી અલગ પડેલા C PLA2માં બે અલગ-અલગ N-ટર્મિનલ છે, અને તેનું પરમાણુ વજન 30000 છે. આ ઘટના PLA2 ના અસમપ્રમાણ ડાઇમરને કારણે થઈ શકે છે, જે પૂર્વીય ડાયમંડબેક રેટલસ્નાકેના ઝેરમાં PLA2 દ્વારા રચાયેલા સપ્રમાણ ડાઇમર જેવું જ છે. અને વેસ્ટર્ન ડાયમંડબેક રેટલસ્નેક.એશિયન કોબ્રા ઘણી પેટાજાતિઓથી બનેલો છે, જેમાંથી કેટલીક વર્ગીકરણમાં બહુ ચોક્કસ નથી.ઉદાહરણ તરીકે, જે કોબ્રા આઉટર કેસ્પિયન પેટાજાતિઓ તરીકે ઓળખાતી હતી તે હવે ઓળખાય છે

તે બાહ્ય કેસ્પિયન સમુદ્ર કોબ્રાને આભારી હોવું જોઈએ.જેમ કે ઘણી પેટાજાતિઓ છે અને તે એકસાથે મિશ્રિત છે, વિવિધ સ્ત્રોતોને કારણે સાપના ઝેરની રચનામાં ઘણો ફેરફાર થાય છે, અને PLA2 આઇસોઝાઇમ્સની સામગ્રી પણ વધારે છે.ઉદાહરણ તરીકે, કોબ્રા ઝેર

r^ll પ્રજાતિના ઓછામાં ઓછા 9 પ્રકારના PLA2 આઇસોઝાઇમ્સ મળી આવ્યા હતા, અને કોબ્રા પેટાજાતિ કેસ્પિયનના ઝેરમાં 7 પ્રકારના PLA2 આઇસોઝાઇમ મળી આવ્યા હતા.ડર્કિન એટ અલ.(1981) એ 18 કોબ્રા ઝેર, 3 મામ્બા ઝેર, 5 વાઇપર ઝેર, 16 રેટલસ્નેક ઝેર અને 3 દરિયાઈ સાપના ઝેર સહિત વિવિધ સાપના ઝેરમાં PLA2 સામગ્રી અને આઇસોઝાઇમ્સની સંખ્યાનો અભ્યાસ કર્યો.સામાન્ય રીતે, કોબ્રા ઝેરની PLA2 પ્રવૃત્તિ વધુ હોય છે, જેમાં ઘણા આઇસોઝાઇમ હોય છે.વાઇપર ઝેરની PLA2 પ્રવૃત્તિ અને આઇસોઝાઇમ મધ્યમ છે.મામ્બા ઝેર અને રેટલસ્નેક ઝેરની PLA2 પ્રવૃત્તિ ખૂબ ઓછી છે અથવા PLA2 પ્રવૃત્તિ નથી.દરિયાઈ સાપના ઝેરની PLA2 પ્રવૃત્તિ પણ ઓછી છે.

તાજેતરના વર્ષોમાં, એવું નોંધવામાં આવ્યું નથી કે સાપના ઝેરમાં PLA2 સક્રિય ડાઇમરના સ્વરૂપમાં અસ્તિત્વમાં છે, જેમ કે પૂર્વીય રોમ્બોફોરા રેટલસ્નેક (C. સાપના ઝેરમાં પ્રકાર a અને પ્રકાર P PLA2 હોય છે, જે બંને બે સરખા સબ્યુનિટ્સથી બનેલા છે. , અને માત્ર dimerase છે

પ્રવૃત્તિ.શેન એટ અલ.એ પણ સૂચવ્યું કે સાપના ઝેરના PLA2 નો માત્ર ડાઇમર એ એન્ઝાઇમનું સક્રિય સ્વરૂપ છે.અવકાશી બંધારણનો અભ્યાસ એ પણ સાબિત કરે છે કે પશ્ચિમી ડાયમંડબેક રેટલસ્નેકનું PLA2 ડાઇમરના સ્વરૂપમાં અસ્તિત્વ ધરાવે છે.માછલીભક્ષી સંયોજન

સાપના ઝેરના બે અલગ-અલગ PLA ^ Ei અને E2 છે, જેમાં 仏 ડાઇમરના સ્વરૂપમાં અસ્તિત્વ ધરાવે છે, ડાઇમર સક્રિય છે, અને તેનું વિચ્છેદિત મોનોમર નિષ્ક્રિય છે.લુ યિંગુઆ એટ અલ.(1980) એ ઇ. જયંતિ એટ અલના ભૌતિક અને રાસાયણિક ગુણધર્મો અને પ્રતિક્રિયા ગતિશાસ્ત્રનો વધુ અભ્યાસ કર્યો.(1989) એ વાઇપરના ઝેરમાંથી મૂળભૂત PLA2 (VRVPL-V) ને અલગ કર્યું.મોનોમર PLA2 નું પરમાણુ વજન 10000 છે, જે ઘાતક, એન્ટીકોએગ્યુલન્ટ અને એડીમા અસરો ધરાવે છે.એન્ઝાઇમ PH 4.8 ની સ્થિતિ હેઠળ વિવિધ પરમાણુ વજનવાળા પોલિમરને પોલિમરાઇઝ કરી શકે છે, અને તાપમાનના વધારા સાથે પોલિમરનું પોલિમરાઇઝેશન અને મોલેક્યુલર વજન વધે છે.96 ° સે પર પેદા થતા પોલિમરનું મોલેક્યુલર વજન 53 100 છે, અને આ પોલિમરની PLA2 પ્રવૃત્તિ બેથી વધે છે.